执业药师《药物分析学》章节知识点：第十六章甾体激素类药物的分析

　　第十六章 甾体激素类药物的分析

　　掌握醋酸地塞米松及其制剂、丙酸睾酮、黄体酮、炔雌醇及其制剂的鉴别、杂质检查和含量测定方法。

　　基本结构与分类

　　天然和人工合成品的甾体激素，均具有环戊烷骈多氢菲母核。分为肾上腺皮质激素、雄性激素及蛋白同化激素、孕激素、雌激素等。

　　1.肾上腺皮质激素

　　结构特点：有21个C原子;A环，具有Δ4-3-酮; C17，有α-醇酮基，并多数为α-羟基;C10、C13，有角甲基;C11，有羟基或酮基;其它，有些皮质激素具有Δ1，6α、9α卤素，16α羟基，6α、12α、16α、16β甲基等。

　　2.雄性激素及蛋白同化激素

　　如甲睾酮、丙酸睾酮、十一酸睾酮等;蛋白同化激素有苯丙酸诺龙。

　　结构特点：雄性激素母核具有19个C原子;蛋白同化激素母核具有18个C原子(C10上无角甲基);A环，具有Δ4-3-酮;C17，无侧链，多数是一个β-羟基，有些是它形成的酯，有些具有α-甲基。

　　3.孕激素

　　中国药典有：黄体酮、醋酸甲羟孕酮、己酸羟孕酮、醋酸甲地孕酮原料及制剂;醋酸氯地孕酮原料等。

　　结构特点：有21个C原子;A环，具有Δ4-3-酮; C17，有甲酮基，其它，有些具有Δ6，6β-甲基、6α-甲基、6β-氯。

　　4.雌激素

　　收载有：雌二醇、炔雌醚原料，苯甲酸雌二醇、戊酸雌二醇、炔雌醇原料及制剂等。

　　结构特点：具有18个C原子; A环，为苯环;C3有酚羟基，有些形成酯或醚;C10，无角甲基;C17，有β-羟基或酮基，有些羟基形成了酯，有些具有乙炔基。

　　第一节 醋酸地塞米松及其制剂的分析

　　一、鉴别

　　1.与碱性酒石酸铜试液反应 C17-α-醇酮基具有还原性，生成橙红色氧化亚铜沉淀

　　2.与硫酸反应 在碱性条件下水解生成醋酸，与硫酸存在下与乙醇发生酯化反应，具乙酸乙酯香气。

　　3.有机氟化物反应 氧瓶燃烧法破坏后，在醋酸-醋酸钠缓冲液中，与茜素氟蓝和硝酸亚铈形成蓝紫色配合物。

　　4.红外光谱法

　　二、特殊杂质检查

　　1.其他甾体 TLC高低浓度对比法，用碱性四氮唑蓝试液作显色剂。

　　2.硒 按药典附录硒检查法，测定吸收度，限度0.005%。

　　三、含量测定

　　1.原料药含量测定 HPLC，内标法以峰面积计算含量

　　2.片剂 紫外分光光度法，吸收系数法计算含量

　　3.注射液 四氮唑比色法

　　原理 皮质激素C17-α-醇酮基具有还原性，在强碱性溶液中能将四氮唑盐定量地还原为有色甲簪。三苯基氯化四氮唑(缩写为TTC)，其还原产物为不溶于水的深红色三苯甲簪，λmax在485nm。

　　测定方法 精密量取对照品溶液及供试品溶液各1ml，分别置干燥具塞试管中，各精密加无水乙醇9ml与氯化三苯四氮唑试液1ml，摇匀，再精密加氢氧化四甲基铵试液1ml，摇匀，在25℃暗处放置40~50min，照分光光度法，在485nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得。

　　讨论 本法广泛用于皮质激素的测定，但测定时受结构、溶剂、显色温度和时间、水分、碱的浓度、空气中氧等，对反应速度、呈色强度和稳定性都有影响。

　　(1)溶剂和水分的影响：5%以下不影响，超过大时，呈色速度减慢，采用无醛溶剂。

　　(2)碱的种类和加入顺序的影响：氢氧化四甲基铵较好，常用。但有研究表明，皮质激素和氢氧化四甲基铵长时间(24h)接触后，皮质激素有部分分解，因此，先加四氮唑盐溶液再加碱液好。

　　(3)空气中氧及光线的影响：反应及其产物对光敏感，因此必须用避光容器并置于暗处显色，同时达到最大显色时间后，立即测定吸收度。

　　(4)温度与时间影响：显色速度随温度增高而加快。一般以室温或30℃恒温条件下显色，易得重线性较好的结果。中国药典多数在25℃暗处反应40~45min。