(1)标本的采集与送检
病毒感染的检查结果取决于标本的正确采集和递送。发病初期或急性期采集的标本,易于分离出病毒。血清学诊断的标本,应在患者急性期和恢复期各取一份血液,以便对比双份血清中抗体效价。
(2)病毒分离培养的方法
①鸡胚接种:鸡胚对多种病毒敏感。根据病毒种类不同,可将标本接种于鸡胚的羊膜腔、尿囊腔、卵黄囊或绒毛尿囊膜上,主要用于流感病毒的分离。
②组织培养:将离体活组织块或分散的活细胞加以培养,统称为组织培养。组织培养法有三种基本类型:器官培养、移植培养和细胞培养。细胞培养最常用于培养病毒。
③动物接种:这是最原始的病毒培养方法。常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔和猴等,接种的途经有鼻内、皮下、皮内、脑内、腹腔内等。根据病毒种类不同,选择敏感动物及适宜接种途径。
(3)病毒感染的血清学诊断方法:
常用的方法有中和试验、补体结合试验、血凝抑制试验等方法。和应用免疫学标记技术发展的酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫试验(RIA)及免疫荧光试验(IF)等特异、灵敏的微量血清学方法。
①中和试验(NT):是指病毒在或体内或细胞培养中,被特异性抗体中和而失去感染性的一种试验。中和抗体特异性高,持续时间较长,因此流行病学常用此法。
②血凝抑制试验:许多病毒能凝集鸡、豚鼠、人等的红细胞,称为血凝现象。这种现象能被相应抗体所抑制,称血凝抑制试验。
③酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫试验(RIA)及免疫荧光试验(IF)
④蛋白印迹试验(WB)
⑤检测病毒核酸的分子生物学试验:聚合酶链反应(PCR);核酸杂交技术;基因芯片技术;病毒基因测序等