第二十二章 真菌
1. 真菌学概述
(1)真菌(fungus),也称Eumycota,来源于拉丁文的fungus,即蘑菇。真菌属于真核细胞型微生物,与原核细胞型微生物有很多区别。
(2)真菌细胞壁含有甲壳质(chitin)和β-葡聚糖。
(3)营养方式为吸收,无吞噬作用,营腐生、寄生、共生和超寄生生活。
2. 原核细胞型微生物与真核细胞型微生物比较
3. 真菌分类: 我国普遍采用的是Ainsworth等分类法,与医学有关的真菌为真菌门中的四个亚门:接合亚门、子囊菌亚门、担子菌亚门、半知菌亚门
4. 真菌的生物学性状
(1)真核细胞型微生物,属于真菌界(Kingdom Myceteae)。它具有典型的细胞核,不含叶绿素,以腐生或寄生方式摄取营养,细胞壁含几丁质(Chitin)和(或)纤维素,有完善细胞器,能进行有性生殖和(或)无性繁殖。
(2)多数对人有益,仅少数导致人类疾病。对人致病的真菌分为四类:病原性真菌、条件(3)致病性真菌、产毒真菌及致癌真菌。
形态学(包括真菌形态、菌落形态)检查对大多数真菌的鉴定具有重要意义 。
5. 形态与结构
(1)单细胞真菌形态:圆形或卵圆形(酵母菌、酵母样真菌)——二相性(dimorphic)
(2)多细胞真菌形态:菌丝和孢子, 丝状菌;交织成团,或霉菌
6. 二相型真菌:
7. 菌丝(hypha):在环境适宜情况下由孢子长出芽管,逐渐延长呈丝状,称菌丝。
① 营养菌丝:伸入培养基; ② 气生菌丝:露出培养基;
③ 生殖菌丝; ④ 有隔菌丝:多数致病性真菌; ⑤ 无隔菌丝;
菌丝形态有助于鉴别。
8. 孢子 spore:① 有性孢子:同一菌体或不同菌体上的2个细胞融合经减数分裂形成;② 无性孢子:菌丝上的细胞分化或出芽生成,不经两性细胞的配合。③ 病原性真菌大多形成无性孢子 。
9. 真菌的生长特性:① 营养要求不高,常用沙保氏培养基;② 基本成分:葡萄糖、蛋白胨、琼脂;③ 生长条件:pH4.0~6.0 温度22~28℃(深部真菌37℃) 较高的湿度、O2;
10. 菌落类型:
(1)酵母型/类酵母型(单细胞真菌菌落形式):
A、湿润、柔软而致密,形态似一般细菌菌落
B、镜下:酵母型——卵圆孢子、芽生孢子;类酵母型——芽生孢子、假菌丝;
(2)丝状菌落(多细胞真菌菌落形式):
A、棉絮状、绒毛状、粉末状(气生菌丝体),菌落正背面呈不同颜色(可为鉴定依据)
B、玻片小培养(镜下、乳酚棉蓝)——孢子、菌丝及完整菌丝体;
11. 抵抗力:
(1)对干燥、日光、紫外线及一般消毒剂抵抗力强;
(2)对热敏感,60℃1小时菌丝、孢子均被杀死;
(3)对2%石碳酸、0.1%升汞、2.5%碘酊或10%甲醛敏感;
(4)对细菌抗生素不敏感;
(5)对二性霉素B、制霉菌素、咪康唑、酮康唑、氟康唑和伊曲康唑敏感;
12. 真菌的致病性和免疫性
(1)致病性:致病性真菌感染、条件致病性真菌感染、真菌超敏反应性疾病、真菌性中毒症、真菌毒素与肿瘤的关系;
(2)免疫性:天然免疫、 获得性免疫
A. ① 致病性真菌感染:外源性真菌感染,如皮肤癣真菌病
② 条件致病性真菌病:内源性真菌感染,机体免疫力低下,如白假丝酵母菌、曲霉、毛霉等引起;
③ 真菌变态反应性疾病:敏感患者吸如孢子或菌丝,引起超敏反应,如寻痲疹、哮喘、变应性鼻炎
④ 真菌中毒:粮食受潮霉变,摄入真菌或其产生的毒素后可引起急、慢性中毒称为真菌中毒症(mycotoxicosis) 。主要有:黄曲霉毒素和镰刀菌毒素。
⑤ 真菌毒素与肿瘤:黄曲霉毒素、镰刀菌T-2毒素、 展青霉素 、黄褐毒素
B. 免疫性:
① 天然免疫(免疫力与机体免疫状态有关):皮肤粘膜屏障作用、正常菌群的拮抗作用、吞噬细胞的作用;
② 获得性免疫(真菌感染的治愈与细胞免疫有关):真菌感染可引发迟发性超敏反应------癣菌疹;
13. 真菌的微生物学检查法
(1)标本:浅部感染真菌取毛发等标本;深部感染真菌取痰、血液、脑脊液等
(2)直接镜检:标本(皮屑、毛发)+10% KOH
假丝酵母菌--取材涂片,革兰染色
隐球菌--脑脊液离心,沉淀涂片,墨汁负染
结果判断:①阴性不能排除感染。 ②组织中分隔分枝的菌丝为曲霉; 粗大、不分隔或不分枝的菌丝为毛霉。③皮肤癣菌菌丝肥大粗长为处于活跃状态。④酵母型和二相型真菌在组织内常为孢子。
(3)分离培养;
14. 临床标本的采集种类
(1)皮肤的角质性物质:毛发、指(趾)、甲、皮屑等。
(2)各种分泌物和排泄物:生殖道分泌物、耳垢、痰、粪便、尿液等。
(3)血液和体液:体液包括胸水、腹水、脑脊液、淋巴穿刺液等。
(4)脓汁及渗出物。
15. 采集标本注意事项
(1)采集的标本要适宜:不同真菌感染应采取不同的临床标 本。怀疑为浅部真菌感染如体癣,应刮取病变边缘的痂、皮屑,发癣应取折断了的病发。怀疑为深部真菌感染应取血液、脑脊液、痰、脓汁等。
(2)在用药前采集标本:一般真菌标本须在用药前采集,对已用药者则需停药一段时间后再采集标本。
(3)采集的标本量要足:血液和脑脊液标本5ml,胸腔液20ml,皮屑标本两块,活体组织两份(一份送病理科检查,一份作镜检和培养)。
(4)严格无菌操作:在采集标本时严格无菌操作,并进行消毒处理,尤其是在采集血液和脑脊液标本时,要避免污染杂菌。
(5)采集的标本立即送检:对采集的标本应立即送检,特别是深部真菌标本采集后最长不超过2h。