2020年公卫执业医师生物化学提高练习：重组DNA技术

　　第十三节 重组DNA技术

　　一、A1

　　1、重组DNA的连接方式不包括

　　A、粘性末端连接

　　B、平头末端连接

　　C、粘性末端与平头末端连接

　　D、DNA连接子技术

　　E、DNA适配子技术

　　2、基因重组不包括

　　A、转化

　　B、转换

　　C、整合

　　D、转导

　　E、转位

　　3、下列哪项不是限制性内切酶识别序列的特点：

　　A、特异性很高

　　B、常由4～6个核苷酸组成

　　C、一般具有回文结构

　　D、少数内切酶识别序列中的碱基可以有规律地替换

　　E、限制性内切酶的切口均是粘性末端

　　4、关于质粒的叙述，下列哪项是错误的：

　　A、大小约为数千个碱基对

　　B、是双链的线性分子

　　C、存在于大多数细菌的胞质中

　　D、易从一个细菌转移入另一个细菌

　　E、常带抗药基因

　　5、实验室内常用的连接外源性DNA载体DNA的酶是：

　　A、Taq酶

　　B、T4DNA连接酶

　　C、DNA聚合酶I

　　D、DNA聚合酶Ⅱ

　　E、DNA聚合酶Ⅲ

　　答案部分

　　一、A1

　　1、

　　【正确答案】 C

　　【答案解析】 重组DNA的连接包括下述内容，其中不包括C。外源DNA片段和线状质粒载体的连接，也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间形成的新的共价链。粘端连接、平端DNA连接、质粒载体中的快速克隆都是重组DNA的连接方式。

　　【该题针对“重组DNA技术”知识点进行考核】

　　2、

　　【正确答案】 B

　　【答案解析】 基因重组只包括：接合、转化、转导或转座。而基因转换特指减数分裂过程中两条染色体非同源DNA片段的转移，不属于基因重组。

　　【该题针对“重组DNA技术”知识点进行考核】

　　3、

　　【正确答案】 E

　　【答案解析】 限制性内切酶可分为两大类，即I类酶和II酶。相当一部分酶(如EcoRI、BamHI、Hind等)的切口，作用点有180°旋转对称性，因而可形成粘性末端，但也有一些II类酶如BsuRI、BalI、HalIII、HPaI、SmaI等切割DNA分子并不产生粘性末端，而只形成平整末端。

　　【该题针对“重组DNA技术”知识点进行考核】

　　4、

　　【正确答案】 B

　　【答案解析】 质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核酸(DNA)分子。已发现有质粒的细菌有几百种，已知的绝大多数的细菌质粒都是闭合环状DNA分子(简称cccDNA)。

　　【该题针对“重组DNA技术”知识点进行考核】

　　5、

　　【正确答案】 B

　　【答案解析】 外源DNA片段和线状质粒载体的连接，也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸，可生成4个新的磷酸二酯链。但如果质粒DNA已去磷酸化，则吸能形成2个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有2个单链切口，当杂本导入感受态细胞后可被修复。相邻的5'磷酸和3'羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的DNA连接酶催化，这两种酶就是大肠杆菌DNA连接酶和T4噬菌体DNA连接酶。实际上在有克隆用途中，T4噬菌体DNA连接酶都是首选的用酶。这是因为在下述反应条件下，它就能有效地将平端DNA片段连接起来。

　　【该题针对“重组DNA技术”知识点进行考核】