白细胞计数
【准备】
1.个人准备 穿好工作服,戴好口罩、帽子。
2.物品准备 查看实验所需器材、试剂是否齐全,如不全,应及时向工作人员提出。查看Neubauer计数板的计数池是否洁净,如有污染应进行清洁。
3.本实验所需器材、试剂:刻度吸管,吸耳球、微量吸管,棉球,试管,Neubauer计数板,盖玻片,计时器,显微镜,白细胞稀释液。
【操作】
1.加稀释液:用吸管吸取白细胞稀释液0.38毫升于小试管中。
2.加血:用微量吸管吸取新鲜全血20μl,擦去管尖外部余血。
3.将吸管插入小试管中白细胞稀释液底部,轻轻放出全血液,并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管2~3次。
4.混匀:将试管中的血液与稀释液混匀,待细胞悬液完全变为棕褐色。
5.充池:再次将小试管中的细胞悬液混匀。
6.用微量吸管吸取细胞悬液,注入Neubauer计数板的计数池中,室温下静置2~3min,待白细胞完全下沉后在做白细胞计数。
7.计数:在低倍镜下计数四角4个大方格内的白细胞总数,计算:白细胞/L=N/20 ×109 (N表示4个大方格内的白细胞总数),报告计数结果。
【操作后】
1.关闭显微镜电源。
2.将使用过的一次性器材,剩余标本置于污物桶中。
【注意事项】
1.加稀释液、血液体积应准确。
2.用微量吸管吸取新全血20μl后,应擦去管尖外部余血。
3.用白细胞稀释液清洗微量吸管是不应有气泡产生
4.充池应一次完成,不可充液过多、过少或有气泡产生。充池后不能移动盖玻片。
5.计数时,各大方格间细胞数相差不超过10%,如相差过大,说明充池不均匀,应重新充池。