脑脊液细胞计数
【准备】
1.个人准备 穿好工作服,戴好口罩、帽子。
2.物品准备 查看实验所需器材、试剂是否齐全,如不全,应及时向工作人员提出。
3.本实验所需器材、试剂、试管、微量吸管、棉球、Neubauer计数板、盖玻片、滴管、计时器、显微镜、冰醋酸。
【操作】
(一)细胞总数计数
1.充分混匀脑脊液标本
2.用微量吸管吸取混匀的脑脊液,冲入血细胞计数板的上下2个计数池。
3.静置2~3min。
4.低倍镜下计数两个计数池内四角和中央大方格共10个大方格内的细胞数。
5.计算:细胞总数/L=N×106/L (N表示10个大方格内的细胞总数)
(二)白细胞计数
1.出去红细胞:在小试管内加入冰乙酸1~2滴,转动试管,使内壁黏附有少量冰乙酸后倾去。
2.滴加混匀的脑脊液3~4滴,混匀,静置5min,使红细胞破坏。
3.充池:充分混匀。
4.用微量吸管吸取混匀后的稀释脑脊液充入2个计数池。
5.计数:静置2~3min待细胞沉降后。
6.低倍镜下计数两个计数池内四角和中央大方格共10个大方格内的细胞数。
7.计算:白细胞总数/L=N×106/L (N表示10个大方格内的白细胞总数)
【操作后】
1.关闭显微镜电源。
2.将使用过的一次性器材,剩余标本置于污物桶中。
【注意事项】
1.应准确控制离心力及离心时间。
2.充池时需充分混匀标本。充池应一次完成,不可充液过多、过少或有气泡产生。充池后不能移动盖玻片。