骨髓涂片铁染色
【准备】
1.个人准备 穿好工作服,戴好口罩、帽子。
2.物品准备 查看实验所需器材、试剂是否齐全,如不全,应及时向工作人员提出。
3.本实验所需器材试剂:滴管、染缸、水浴箱、显微镜、擦镜纸、计时器、酸性亚铁氰化钾、甲醇固定液、蒸馏水、核固红染液复染液、乙醚。
【操作】
1.干燥骨髓涂片用甲醇固定10min。待干。
2.玻片上滴满酸性亚铁氰化钾,37℃染色30min。
3.用蒸馏水冲洗后。
4.用核固红染液复燃10~15min。
5.流水冲洗.
6.待干,镜检。
7.判断细胞外铁含量(细胞外铁:(-):无颗粒;(+):有少量铁颗粒获偶见铁小珠;(++):有较多的铁颗粒或小珠;(+++):有很多的铁颗粒 小珠或小块状。(++++):有极多铁颗粒小珠,并有很多的小块,密集成堆)。
8.判断细胞内铁含量(细胞内铁:用油镜计数100个中晚幼红细胞,记录胞质中含有蓝色铁颗粒的细胞(记录铁粒幼细胞)的百分率)。
【操作后】
1.用滴有乙醚的擦镜纸擦拭油镜镜头。
2.关闭显微镜电源。
3.将使用过的一次性器材,剩余标本置于污物桶中。
【注意事项】
1.所用器材必须清洁,无铁污染。
2.骨髓取材要满意,外铁一定要有骨髓碎块或颗粒,取材不佳时,往往影响结果。
3.酸性亚铁氰化钾溶液须新鲜配制。
4.应准确控制固定及染色时间。
5.细胞内铁计数以中、晚幼红细胞为准。