1.绿色植物甲含有物质W,该物质为无色针状晶体,易溶于极性有机溶剂,难溶于水,且受热、受潮易分解。其提取流程为:植物甲→粉碎→加溶剂→振荡→收集提取液→活性炭处理→过滤去除活性炭→蒸馏(含回收溶剂)→重结晶→成品。回答下列问题:
(1)在提取物质W时,最好应选用的一种原料是____(填“高温烘干”“晾干”或“新鲜”)的植物甲,不宜选用其他两种的原因是__。
(2)提取物质W时,振荡的作用是_______。
(3)活性炭具有很强的吸附能力,在提取过程中,用活性炭处理提取液的目的是___________。
(4)现有丙酮(沸点56℃)、乙醇(沸点约78℃)两种溶剂,在提取物质W时,应选用丙酮作为提取剂,理由是________。
(5)该实验操作过程中应注意的事项是______(答出两点即可)。
解析 (1)高温烘干过程中,植物甲中的物质W易被破坏;新鲜的植物甲含水量高,用于提取的极性有机溶剂会被水稀释,进而降低对物质W的提取效果,因此,原料应选用晾干的植物甲。
(2)提取物质W时,振荡的作用是使粉碎的颗粒与有机溶剂充分混匀,从而使物质W充分溶解于极性有机溶剂中。
(3)绿色植物甲中含有色素,色素也能溶于有机溶剂,用活性炭处理提取液的目的是去除提取液中的色素,以增加成品的纯度。
(4)与乙醇相比,丙酮的沸点较低,而物质W受热易分解,故应选用丙酮作为提取剂,蒸馏时物质W分解较少。
(5)在该实验操作过程中应注意的事项是在温度较低的情况下操作,防火,控制处理的时间等。
答案 (1)晾干 高温烘干过程中,植物甲中的物质W易被破坏;新鲜的植物甲含水量高,用于提取的极性有机溶剂会被水稀释,进而降低对物质W的提取效果 (2)使原料和溶剂充分混匀 (3)去除提取液中的色素 (4)丙酮沸点低于乙醇,蒸馏时物质W分解较少 (5)在温度较低的情况下操作,防火
2.已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题:
(1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用于_____染色。微生物A产生的油脂不易挥发,可选用_____(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。
(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以____为碳源的固体培养基进行培养。
(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用____直接计数;若要测定其活菌数量,可选用____法进行计数。
(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg,则上述三个温度中,_______ ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕________℃设计后续实验。
解析 (1)油脂可被苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液染成橘黄色(或红色)。由于微生物A产生的油脂不易挥发,故采用萃取法。(2)脂肪酶的微生物B可以分解脂肪,故可以以脂肪为碳源的固体培养基进行培养,不产生脂肪酶的微生物无法生存。(3)微生物B的菌体数,可在显微镜下用血细胞计数板直接计数;活菌用稀释涂布平板法,只有活的菌体才能形成菌落。(4)45℃降解10g油脂所需酶量最大,故酶活性最小;40℃温度下,降解10g油脂所需酶量最小,故酶活性最大,由此可知要想探究该酶的最适温度需要围绕40℃温度设置温度梯度进行实验。
答案 (1)苏丹Ⅲ(或者苏丹Ⅳ) 萃取法 (2)油脂 (3)血细胞计数板 稀释涂布平板 (4)45 40
3.回答与胡萝卜有关的问题:
(1)胡萝卜含有的胡萝卜素中,最主要的是_______(填“α—胡萝卜素”或“β—胡萝卜素”或“γ—胡萝卜素”),该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子_____________,后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症,该疾病称为________,胡萝卜素是_____________(填“挥发性”或“非挥发性”)物质。
(2)工业生产上,用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时,______(填“需要”或“不需要”)将新鲜的岩藻干燥。
(3)现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂,应选用其中的______作为胡萝卜素的萃取剂,不选用另外一种的理由是_________。
解析 (1)胡萝卜中含有的主要是β—胡萝卜素,β—胡萝卜素可在人体内可转变成维生素A。夜盲症是由于维生素A缺乏导致。胡萝卜素没有挥发性。
(3)作为萃取胡萝卜素的萃取剂要有较高的沸点、能充分溶解胡萝卜素且与水不混溶。胡萝卜素虽可溶于乙醇,但乙醇是水溶性有机溶剂,萃取中能与水混溶而影响萃取效果,所以不能用乙醇做萃取剂。
答案 (1)β—胡萝卜素 维生素A 夜盲症 非挥发性 (2)需要 (3)乙酸乙酯 萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶,而乙醇为水溶性有机溶剂
4.真核生物细胞内,大量DNA和蛋白质以及一些RNA等混杂在一起,难以分离。生物兴趣小组的同学为了获得纯度相对较高的DNA展开了实验探究。
(1)分离各种物质的基本思路是根据DNA和其他物质理化性质的不同而采取一定的方法,如图表示从各种物质间______________存在差异这一角度开展了研究:
a.取鸡血细胞悬液10 mL,加蒸馏水20 mL,同时用玻璃棒_________(填“缓慢”或“快速”)搅拌。过滤、取滤液,然后将滤液转移到塑料材质的大烧杯中。
b.沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液,用玻璃棒沿一个方向________(填“缓慢”或“快速”)搅拌,同时不断收集析出的物质。根据图示鸡血中几种物质的析出情况分析:
①如果只收集纤维蛋白,可采取的措施是______。
②DNA在浓度约为 ______(填最小值)的硫酸铵溶液中溶解度最小,此浓度下与其同时析出的物质还有________。
(2)如果要进一步去除其他杂质,尽可能提高获得的DNA纯度,可采取的两种办法有
解析 (1)分析曲线图可知,不同物质在不同浓度的硫酸铵中析出的相对量有所差别,即分离各种物质的基本思路是根据DNA和其他物质之间溶解度的差异进行分离。
a.取鸡血细胞悬液10 mL,加蒸馏水20 mL,此时可以用玻璃棒快速搅拌,以加速血细胞的破裂;
b.沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液。为了防止将DNA的丝状物搅碎,此时应用玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌,同时不断收集析出的物质;
①从图中看出,纤维蛋白析出所需的硫酸铵浓度最低,硫酸铵浓度在20%之前已经开始析出,在浓度为30%时析出最多,另外,超过30%后球蛋白也将逐渐析出,因此如果只收集纤维蛋白,可以在硫酸铵浓度达到30%之前收集析出物。
②从图中看出,DNA在浓度约为65%的硫酸铵溶液中析出量最大,此时溶解度最小,与此同时析出的物质还有球蛋白、纤维蛋白和少量的tRNA。
(2)如果要进一步去除其他杂质,尽可能提高DNA的纯度,可在溶有DNA与蛋白质的溶液中加入冷却的95%的酒精,由于DNA不溶于酒精,而其他杂质可溶于酒精,因此收集的析出物即为较高纯度的DNA;酶具有专一性,可以用嫩肉粉(木瓜蛋白酶)处理溶有DNA与蛋白质的溶液,此时蛋白质可以水解,因此可以分离DNA和蛋白质;又由于DNA和蛋白质对高温的耐受性不同,将溶有DNA与蛋白质的溶液放在60~75 ℃的恒温水浴箱中保温一段时间,可以去除蛋白质。
答案 (1)溶解度 a.快速 b.缓慢 ①在硫酸铵浓度达到30%之前收集析出物 ②65% 纤维蛋白、球蛋白和少量的tRNA (2)在溶有DNA与蛋白质的溶液中加入冷却的95%的酒精,收集析出物;用嫩肉粉(木瓜蛋白酶)处理溶有DNA与蛋白质的溶液;将溶有DNA与蛋白质的溶液放在60~75 ℃的恒温水浴箱中保温一段时间