1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?
答案:无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。
(1)培养细菌用的培养基与培养皿。
(2)玻璃棒、试管、烧瓶和吸管。
(3)实验操作者的双手。
答案:(1)(2)需要灭菌;(3)需要消毒。培养基用高压蒸汽灭菌,培养皿、玻璃棒、试管、烧瓶、吸管可以采用干热灭菌法,实验操作者的双手可以用酒精擦拭。
3.培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?
答案:可以通过用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。
4.为什么需要使锥形瓶口通过火焰?
答案:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。
5.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?
答案:平板冷凝后,皿盖会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
6.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?
答案:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。
7.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?
答案:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养基,每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种;需要;划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。
8.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?
答案:以免接种环温度太高,杀死菌种。
9.在作第二次以及其后的划线操作时为什么总是从上一次划线的末端开始划线?
答案:划线后,线条末端的细菌数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
10.涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,第2步应如何进行无菌操作?(教材P19)
答案:酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等。