2017四级公共营养师章节高频考点:第二章 样品的采集、保存及预处理

　　要求

　　1、掌握采样的原则、步骤、方式以及　样品的保存等。

　　2、掌握样品制备的不同方法和各自的

　　特点：

　　第一节 样品的采集

　　一、食品分析的性质

　　非全面性检验

　　建立总体与样品的概念

　　二、采样

　　采样

　　从大量的分析对象中抽取有代表性的一部分样品作为分析材料的工作。

　　属性采样

　　分类

　　变量采样

　　三、采样原则

　　1、样品要均匀、有代表性

　　2、要保持样品原有的理化性质

　　四、采样步骤

　　1、从大批物料中的各个部分采集的

　　少量物料称为检样。

　　2、许多检样组合在一起形成原始样品。

　　3、原始样品经处理，再抽取其中一部

　　分作为分析用，称分析样。

　　五、采样方式

　　1、随机抽样

　　按照随机原则，从大批物料中抽取部分样品，使总体中每份样品被抽取的机率都相等的方法。

　　对被测样品不大了解或检验产品的合格率。

　　2、系统抽样

　　根据样品随时间或空间(位置)的变化规律，采集能代表其相应部分的组成和质量的样品进行采样的方法。

　　已经了解样品检验食品的保质期

　　3、指定特殊性样品

　　用于有某种特殊检测重点的样品的采样。

　　不遵循均匀采样原则

　　五、采样方法

　　1、均匀的固体样品

　　① 有完整包装的

　　采样数量=√ 总件数/2

　　过程

　　从被检包装的不同部位采样(检样)

　　(随机或系统方式)

　　↓

　　检样合并、混匀 (原始样)

　　↓ 四分法

　　平均样 (分析样)

　　↓ 缩分

　　测定样

　　② 无包装的散样

　　划分若干等体积层

　　↓

　　每层的中心和四角各取少量 (检样)

　　↓

　　合并、混匀 (原始样)

　　↓四分法缩分

　　分析样

　　2、半固体样品

　　① 有包装的按有包装的固体样执行

　　② 无包装的分上、中、下三层取样

　　→混匀

　　3、液体样

　　① 包装体积不太大的

　　确定采样数量

　　↓ 抽样

　　打开包装、混合

　　↓ 摇匀

　　分取到所需数量

　　② 大桶及散装样

　　分层虹吸法

　　↓

　　每层 500 ml

　　↓混匀

　　分取到所需数量

　　* 组成不均匀的固体样品

　　分别取不同部位的少量样品 (检样)

　　↓

　　混合并捣碎均匀 (原始样)

　　↓ 四分法缩分

　　所需数量 (分析样)

　　原则：纵向取样

　　第二节 样品保存

　　一、标签注明

　　样品名称, 采样地点, 采样日期,

　　样品批号, 采样方式, 采样数量,

　　分析项目, 采样人

　　二、保存原则

　　由于食品具有易变性，保存的原则

　　是使其离开总体后的变化降到最小

　　三、保存方法

　　1、放在密闭、洁净的容器里防止污染。

　　2、易变质样品要低温或充氮保存，降低化学或生物反应速度，时间不易过长。

　　3、稳定水分。水分含量直接影响食品中各物质的浓度和组成比例。

　　4、易光解的样品避光保存。

　　5、感观形状极不相同的样品，不可混装。

　　6、法律样品必须密封，并尽快分析。

　　“单、冷、密、快”

　　四、检验样品的制备

　　取可食部分

　　粉碎：含水少或含油脂少

　　匀浆：含水多或含油多

　　预干燥：含水多，含油少

　　脱脂：含油多

　　第三节 样品预处理

　　一、为什么要进行预处理

　　二、预处理的目的

　　三、预处理的要求

　　四、预处理方法

　　预处理方法

　　提取

　　净化(分离)

　　浓缩

　　衍生

　　(一)溶剂提取法

　　利用样品中各组分在某一溶剂中溶解度不同将其溶解分离的方法。

　　常用方法：

　　1、浸提法(液-固萃取法)

　　将样品浸泡在溶剂中，将固体样品中的某些待测组分浸提出来的方法。

　　(1)提取剂的选择

　　a、被提取物的极性

　　b、提取剂的沸点(40～80℃)

　　c、被提取物的溶解性

　　d、毒性

　　(2)提取方法

　　① 振荡浸提法

　　样品切碎→置溶剂中→振荡浸提

　　特点：简便易行、回收率低

　　适用：样品测定不需要定量时

　　② 捣碎提取法

　　样品磨碎→加提取剂→

　　在振荡器上使被测组分提取出来

　　特点：回收率高，但干扰较多

　　适用：许多食品分析中的定量测定

　　③ 索氏提取法

　　方法：反复回流提取

　　特点：提取剂用量少、提取完全、

　　回收率高，但时间较长

　　适用：含水量少的固体样品

　　④ 超声提取法

　　样品磨碎→加提取剂→在超声波提取器上使被测组分提取出来。

　　特点：高频振荡、提取迅速、完全

　　适用：许多食品分析

　　中的定量测定

　　2、萃取法(液-液萃取法)

　　利用被测组分在互不相溶的两溶剂中分配系数不同而达到分离。

　　特点：设备简单、操作迅速、分离效果好，

　　成批样品分析时工作量大，有一定毒性。

　　萃取剂的选择

　　与提取液不相溶

　　两相分离的难易

　　样品前处理新技术

　　固相萃取法(SPE)

　　基质固相分散萃取法(MSPDE)

　　超临界萃取法(SFE)

　　无溶剂固相微萃取法(SPME)

　　微波萃取

　　……

　　固相萃取法(SPE)

　　原理：以固定相作为载体，当提取液流经时，将被测组分截留,与其他不易截留组分分离.然后用溶剂将被测组分洗脱下来。

　　特点：省时简便,有机溶剂少,可分离净化,富集效果好，接触毒物少，应用广泛。

　　例如

　　三聚氰胺呈弱碱性(弱阳离子化合物)，采用阳离子交换柱进行净化可达到去除杂质，提高检测灵敏度、重现性和回收率的效果。

　　基质固相分散萃取法(MSPDE)

　　将试样直接与适量的填料研磨，混合制成半固态装柱淋洗。

　　将样品匀化、提取、萃取、净化合为一体，减少有机溶剂用量、简化操作步骤，缩短分析时间，提高分析的准确度

　　Fig. 2 The chromatogram of standard solution of Sudan

　　超临界流体萃取法(SFE)

　　Supercritical Fluid Extraction

　　超临界流体及其性质

　　a.流体是非液非气的,具有气体较强的

　　穿透能力和液体较大的密度及溶解度,

　　有较大的吸附能力,流动性好.

　　b.萃取速度快

　　二氧化碳超临界萃取的优点

　　接近常温, 对物质没有变解作用.

　　易达到Pc和Tc

　　化学稳定性好, 安全、无污染

　　萃取时间短

　　费用低

　　适用热敏感样品

　　有防氧化和抑菌作用

　　什么物质适于CO2超临界萃取

　　• 分子量< 500的非极性物质

　　• 改变流体极性后某些极性物质

　　超临界流体萃取装置

　　超临界萃取在食品分析中的应用

　　营养素的提取

　　香精香料的提取

　　脂类物质的提取

　　功能成分提取

　　色素提取

　　农药残留提取等

　　新技术的特点：

　　省时、省力、节省溶剂

　　微污染/无污染

　　样品用量少、提取净化效率高

　　微型化和自动化

　　(二)有机物破坏法：主要用于矿物元素的测定。在不损失矿物质的前提下，将有机物在高温或强氧化条件下破坏，使矿物元素从中游离出来的方法。

　　1、干灰化法：

　　原理：样品炭化→高温灼烧 →残渣用稀酸溶解后测定

　　特点：简便易行，破坏彻底，使用试剂少。时间长，容器吸附，易使低沸点元素损失。

　　适用：粮食、豆类、脱水蔬菜等干样。

　　2、湿灰化法：

　　原理：样品+强氧化剂消煮→有机物破坏，待测组分呈离子状→ 测定。

　　特点：简便快速，破坏彻底，减少金属挥发。酸气刺激性大，腐蚀性大，试剂用量大，样品易溢出。

　　适用：低沸点、粘稠、高脂、高糖的样品。常用的消化方法

　　① 硫酸消化法

　　② 硝酸-高氯酸消化法

　　③ 硝酸-硫酸消化法

　　④ 高氯酸—硝酸-硫酸消化法

　　⑤ 硫酸酸-高氯酸消化法

　　消化技术

　　① 敞口消化

　　② 回流消化

　　③ 冷消化

　　3、微波消解技术

　　原理：利用微波的穿透性和激活反应能力，加热密闭容器内的试剂和样品，可使制样容器内压力增加，反应温度提高，从而大大提高了反应速率。

　　特点：缩短制备时间，控制反应条件，减少对环境的污染

　　方法：浓硝酸、H2O2共热，直至样品液透明。

　　适用：任何样品，尤其是高油样品。

　　4、注意事项

　　试剂纯度高并要求空白试验所用器皿需酸处理(1+5硝酸)，去离子水洗净烘干。消化中补酸时要停止加热

　　(三)蒸馏法

　　利用食品中各组分挥发性的差异(沸点不同)而进行分离的方法，有分离和净化的双重功效。

　　常用的蒸馏法：

　　1、常压蒸馏

　　2、减压蒸馏

　　3、水蒸气蒸馏

　　常压蒸馏

　　适用范围：被测组分不易分解或沸点不太高的组分。

　　减压蒸馏

　　适用范围：被测组分受热易分解、沸点较高的样品水蒸气蒸馏，用水蒸气加热被测物质，使组分同水蒸气一起蒸馏出来

　　收集馏液

　　适用范围：高沸点或易分解、易挥发物质。

　　(四)层析(色谱)分离法：是一种在特定载体上进行物质分离的一些方法的总称。

　　原理：由一种流动相，带着被分离的物质流经固定相，根据吸附原理不同，使试液中各组分分离，是应用最广泛的分离技术之一。

　　分离机理

　　优点

　　最大优点是分离效率高，能把各种性质极为相似的物质彼此分离。

　　常用的色层分离方法

　　• 柱层析(包括 GC、HPLC)

　　• 纸层析

　　• 薄层层析

　　(五)化学分离法：利用化学反应分离出被测组分的方法

　　1、磺化法和皂化法：处理油脂或含油样时常用的方法，也可用于食品中农药残留的分析。

　　(1)磺化法

　　原理：以硫酸处理样品提取液，硫酸使其中的脂肪磺化，并与脂肪和色素中的不饱和键起加成作用，生成溶于硫酸和水的强极性化合物，从有机溶剂中分离出来。

　　适用范围：在强酸中稳定的化合物，如有机氯中的六六六、DDT

　　(2)皂化法

　　原理：以热氢氧化钾-乙醇溶液与脂肪及杂质发生皂化反应而将其除去。

　　适用范围：对碱稳定的化合物，如维生素A、D、E 等

　　2、沉淀分离法：利用沉淀反应分离干扰成分的方法。

　　原理：在试样中加入沉淀剂，利用沉淀反应将被测组分或干扰组分沉淀下去，过滤或离心分离。

　　沉淀形式

　　a、盐析

　　b、有机溶剂沉淀

　　c、等电点沉淀

　　3、掩蔽法

　　向试液中加入掩蔽剂，使干扰组分改变存在状态，以消除对被测组分的干扰。

　　优点：免去分离的操作，简化步骤

　　应用：样品净化，尤其测金属元素

　　(六)浓缩法

　　常用方法

　　1、常压浓缩：对非挥发性和热稳定性样品

　　方法：直接挥发

　　优点：简便、快速

　　2、减压浓缩：对热不稳定或易挥发样品

　　方法：水浴加热并减压

　　优点：温度低、速度快、损失小

　　热推：2017年公共营养师代报名专题——18岁申请代报!

　　小编推荐：各地2016年公共营养师报名时间及入口 公共营养师考试在线题库_手机题库

　　2016年公共营养师真题及答案 成绩查询时间 报考完全指南 考试时间11月20日

1	点击查看>>>>2016营养师考试应试技巧_模拟训练_网络课程
2	点击查看>>>>不要走弯路——2016公共营养师考前2个月备考方案
3	点击查看>>>>2016公共营养师考试在线题库_手机题库_下载

　　2016年公共营养师精品班套餐：导师团队精讲章节，解析大纲、总结考点，准确把握考试命脉，高分取证!套餐特色：考试大纲解析, 详解知识章节, 重点高度总结，考点一次把握,协助 代 报考，省去繁琐流程,免费在线模考，检验学习效果,导师在线答疑，及时高效解惑, 课件免费下载，随心自在学习.　　快速联系通道

>>>>2016年公共营养师精品班套餐 取证+就业 双证班 临考套餐<<<<