2017年公共卫生执业医师《医学微生物学》考点解析：第四章消毒与灭菌_第2页

　　高压蒸汽灭菌效果的监测：有以下三种方法。

　　第一种是工艺监测，又称程序监测。根据安装在灭菌器上的量器(压力表、温度表、计时表)、图表、指示针、报警器等，指示灭菌设备工作正常与否。此法能迅速指出灭菌器的故障，但不能确定待灭菌物品是否达到灭菌要求。此法作为常规监测方法，每次灭菌均应进行……

　　第二种是化学指示监测。利用化学指示剂在一定温度与作用时间条件下受热变色或变形的特点，以判断是否达到灭菌所需参数。常用的有：自制测温管：将某些化学药物的晶体密封于小玻璃管内(长2cm，内径1～2mm)制成。常用试剂有苯甲酸(熔点121-123℃)等。灭菌时，当湿度上升至药物的熔点，管内的晶体即熔化，事后，虽冷却再凝固，其外形仍可与未熔化的晶体相区别，此法只能指示温度，不能指示热持续时间是否已达标，因此是最低标准。主要用于各物品包装的中心情况的监测。

　　3M压力灭菌指示胶带：此胶带上印有斜形白色指示线条图案，是一种贴在待灭菌的无菌包外的特制变色胶纸。其粘贴面可牢固地封闭敷料包、金属盒或玻璃物品，在121℃经20分钟，130℃经4分钟后，胶带100%变色(条纹图案即显现黑色斜条)。3M胶带既可用于物品包装表面情况的监测，又可用于对包装中心情况的监测，还可以代替别针，夹子或带子使用。

　　第三种是生物指示剂监测。利用耐热的非致病性细菌芽胞作指示菌，以测定热力灭菌的效果。菌种用嗜热脂肪杆菌，本菌芽胞对热的抗力较强，其热死亡时间与病原微生物中抗力最强的肉毒杆菌芽胞相似。生物指示剂有芽胞悬液、芽胞菌片以及菌片与培养基混装的指示管。检测时应使用标准试验包，每个包中心部位置生物指示剂2个，放在灭菌柜室的5个点，即上、中层的中央各一个点，下层的前、中、后各一个点。灭菌后，取出生物指示剂，接种于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，置55-60℃温箱中培养48小时至7天，观察最终结果。若培养后颜色未变，澄清透明，说明芽胞已被杀灭。达到了灭菌要求。若变为黄色混浊，说芽胞未被杀灭，灭菌失败。

　　[干热灭菌与湿热灭菌的比较]干热与湿热灭菌虽然都是利用热的作用杀菌，但由于本身的性质与传导介质不同，所以其灭菌的特点亦不一样(表5-1)。

　　表5-1 干热灭菌与湿热灭菌的比较

　　湿热与干热各有特点，互相很难完全取代，但总的说来，湿热的消毒效果较干热好，所以使用也普遍。湿热较干热消毒效果好的原因有三;①蛋白质在含水多时易变性，含水量多，愈易凝固;②湿热穿透力强，传导快。③蒸汽具有潜热，当蒸汽与被灭菌的物品接触时，可凝结成水而放出潜热，使湿度迅速升高，加强灭菌效果。

　　2.国徽消毒灭菌包括光照消毒和电离国徽。光消毒主要是利用紫外线照射，使菌体蛋白发生光解、变性，菌体内的氨基酸、核酸、酶遭到破坏而致细菌死亡。紫外线通过空气时，可使空气中的氧气电离产生臭氧，加强了杀菌作用。紫外线穿透性差，不能透过玻璃，尘埃，纸张和固体物质;透过空气能力较强，透过液体能力很弱。光照消毒对杆菌杀菌力强，对球菌较弱，对霉菌、酵母菌更弱。对生长期细菌敏感，对芽胞敏感性差。光照消毒因地区、季节、环境的影响，效果有所差异，当温度低于4℃，湿度超过50%时，杀菌能力减弱。因此，消毒时，必须提高温度，延长消毒时间，一般室温保持在10-25℃为宜。减少空气中的尘埃，直接照射物品，可提高消毒的效果。

　　(1)日光曝晒法日光由于其热、干燥和紫外线作用，具有一定的杀菌力，将物品放在直射日光下，曝晒6小时，定时翻动，使物体各面均受日光照射。此法多用于被褥、床垫、毛毯、书籍等物品的消毒。

　　(2)紫外线灯管消毒法紫外线因其光谱位于紫色可见光之外，故称紫外线。紫外线灯管是一种人工制造的低压汞石英灯管，管内注入压强0.4～0.6kPa的氩气和水银数滴，管子两端用钨丝作成螺旋状电极。通电后，氩气先电离，然后冲击水银电离，发放紫外线。经5-7分钟后受紫外线照射的空气，才能使氧气产生臭氧。因此消毒时间应从灯亮5-7分钟后计时，紫外线杀菌能力与其波长有密切关系。最佳杀菌波长为2537nm(是细菌对紫外线吸收最快的波长)。

　　常用的紫外线灯管有15W、20W、30W、40W四种，可采用悬吊式，移动式灯架照射，或紫外线消毒箱内照射。紫外线灯配用抛光铝板作反向罩，可增强消毒效果。

　　用于物品消毒时，如选用30W紫外线灯管，有效照射距离为25-60cm，时间为25-30分钟(物品要摊开或挂起，扩大照射面)。

　　用空气消毒时，室内每10m2安装30W紫外线灯管1支，有效距离不超过2m.照射时间为30-60分钟，照射前清扫尘埃，照射时关闭门窗，停止人员走动。

　　注意事项：①注意眼睛、皮肤的保护，照射时嘱病人勿直视紫外线光源，可戴墨镜，或有用纱布遮盖双眼。用被单遮盖肢体，以免引起眼炎或皮肤红斑。②紫外线灯管要保持清洁透亮。灯管要轻拿轻放。关灯后应间隔3-4分钟后才能再次开启。一次可连续使用4小时。③定期监测消毒效果。紫外线的杀菌力取决于紫外线输出量的大小，灯管的输出强度随使用时间的增加而减弱。故日常消毒多采用紫外线强度计或化学指示卡进行监测，新管(30W)不低于100μW/cm2;使用中的旧管在50-70μW/cm2，则需延长消毒时间;低于50μW/cm2者必须更换。定期进行空气细菌培养，以检查杀菌效果。

　　(3)臭氧灭菌灯(电子灭菌灯)消毒法灭菌灯内装有1-4支臭氧发生管，在电场作用下，将空气中的氧气转换成高纯臭氧。臭氧主要依靠其强大的氧化作用而杀菌。使用灭菌灯时，关闭门窗，确保消毒效果。用于空气消毒时，人员须离开现场，消毒结束后20-30分钟方可进入。

　　(4)电离辐射灭菌法应用放射性同位素r源或直线加速器发生的高能量电子束进行灭菌。适用于忌热物品的常温灭菌方法。又称“冷灭菌”。尤其对一次性应用的医疗器材、密封包装后需长期储存的器材、精密医疗器材和仪器，以及移植和埋植的组织和人工器官，节育用品等特别适用。

　　3.空气净化空气本身缺乏细菌维持生活所需的营养物，再加上日光对细菌的影响，故空气中细菌很少。但如果室内光照和通风较差，同时微生物不断地从室内人群的呼吸道、皮肤排出，以及室内物品表面的浮游菌。使室内空气中细菌比室外多。利用通风或空气过滤器可使室内空气中的细菌、尘埃大降低，达到净化目的。

　　(1)自然通风定时开放门窗，以通风换气，这样可降低室内空气含菌的密度，短时间内使大气中的新鲜空气替换室内的污浊空气。通风是目前最简便、行之有效的净化空气的方法。通风的时间可根据湿度和空气流通条件而定。夏季应经常开放门窗以通风换气;冬季可选择清晨和晚间开窗，每日通风换气两次，每次20-30分钟。

　　(2)空气过滤除菌是医院空气净化措施中采取的现代化设备。即使空气通过孔隙小于0.2μ的高效过滤器，利用物理阻留、静电吸附等原理除去介质中的微生物。通过过滤除菌使病室、手术室或无菌药物控制室内的空气达到绝对净化的目的。

　　凡在送风系统上装备高效空气过滤器的房间，称生物洁净室。适用于无菌护理室、无菌手术室等。空气净化的进展，为重大手术的开展和治疗大面积烧伤病人防止感染，提供了更加有利的条件。

　　4.超声波消毒法是利用频率在20-200kHz的声波作用下，使细菌细胞机械破裂和原生质迅速游离，达到消毒目的。如超声洗手器，用于手的消毒。超声洗涤机，用于注射器的清洁和初步的消毒处理。

　　(二)化学消毒灭菌法利用化学药物渗透细菌的体内，使菌体蛋白凝固变性，干忧细菌酶的活性，抑制细菌代谢和生长或损害细胞膜的结构，改变其渗透性，破坏其生理功能等，从而起到消毒灭菌作用。所用的药物称化学消毒剂。有的药物杀灭微生物的能力较强，可以达到灭菌，又称为灭菌剂。

　　凡不适于物理消毒灭菌而耐潮湿的物品，如锐利的金属、刀、剪、缝针和光学仪器(胃镜、膀胱镜等)及皮肤、粘膜，病人的分泌物、排泄物、病室空气等均可采用此法。

　　1.化学消毒灭菌剂的使用原则

　　(1)根据物品的性能及病原体的特性，选择合适的消毒剂。

　　(2)严格掌握消毒剂的有效浓度、消毒时间和使用方法。

　　(3)需消毒的物品应洗净擦干，浸泡时打开轴节，将物品浸没于溶液里。

　　(4)消毒剂应定期更换，挥发剂应加盖并定期测定比重，及时调整浓度。

　　(5)浸泡过的物品，使用前需用无菌等渗盐水冲洗，以免消毒剂刺激人体组织。

　　2.常用化学消毒灭菌方法

　　(1)浸泡法选用杀菌谱广、腐蚀性弱、水溶性消毒剂，将物品浸没于消毒剂内，在标准的浓度和时间内，达到消毒灭菌目的。

　　(2)擦拭法选用易溶于水、穿透性强的消毒剂，擦拭物品表面，在标准的浓度和时间里达到消毒灭菌目的。

　　(3)薰蒸法加热或加入氧化剂，使消毒剂呈气体，在标准的浓度和时间里达到消毒灭菌目的。

　　适用于室内物品及空气消毒或精密贵重仪器和不能蒸、煮、浸泡的物品(血压计、听诊器以及传染病人用过的票证等)，均可用此法消毒。

　　①纯乳酸常用于手术室和病室空气消毒。每100m2空间用乳酸12ml加等量水，放入治疗碗内，密闭门窗，加热熏蒸，待蒸发完毕，移去热源，继续封闭2小时，随后开窗通风换气。

　　②食醋5-10ml/m3加热水1-2m3，闭门加热熏蒸到食醋蒸发完为止。因食醋含5%醋酸可改变细菌酸碱环境而有抑菌作用，对流感、流脑病室的空气可进行消毒。

　　此外，尚可应用甲醛或过氧乙酸等进行熏蒸灭菌(详见表5-2)。