第三节 提取与分离
一、皂苷的提取
1.甲醇或乙醇提取-正丁醇萃取法(提取通法)
一般常用不同浓度的乙醇或甲醇作溶剂提取皂苷。醇提取物混悬于水中,先用石油醚、乙醚等亲脂性有机溶剂萃取,除去亲脂性杂质,然后再用水饱和的正丁醇萃取,得到总皂苷。
2.甲醇或乙醇提取-丙酮或乙醚沉淀法
醇提取液适当浓缩后,加入适量的丙酮或乙醚,则皂苷可能被沉淀析出。
3.碱水提取法
一些酸性皂苷,可依其难溶于水,易溶于碱水的性质,先用碱水提取,再加酸酸化使皂苷沉淀析出。
二、皂苷元的提取
一般采用加酸加热将粗皂苷水解,再用与水不相混溶的弱极性有机溶剂,如苯、氯仿等从水解液中将皂苷元提取出来,或者直接用酸水加热水解中药原料中的皂苷,滤除不溶物,水洗,干燥,再用有机溶剂提取皂苷元。
在加酸加热水解提取皂苷元时,应注意在剧烈条件下苷元结构发生脱水、环合、双键位移等变化。
分离含有羰基的甾体皂苷元,常用吉拉尔T(Girard T)或吉拉尔P(Girard P)试剂。
三、皂苷的分离与纯化
1.吸附色谱法
常用的吸附剂是硅胶、氧化铝和反相硅胶,洗脱剂一般采用混合溶剂。
2.分配色谱法
一般用低活性的氧化铝或硅胶作吸附剂,用不同比例的氯仿-甲醇-水或其他极性较大的有机溶剂进行梯度洗脱。
3.高效液相色谱法
一般使用反相色谱法,以乙腈-水或甲醇-水为流动相分离和纯化皂苷。
4.其他方法
分段沉淀法、胆甾醇沉淀法、铅盐沉淀法、大孔吸附树脂法、液滴逆流色谱法。
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