一、选择题
1.现有甲、乙两种植物(均为二倍体纯种)，其中甲种植物的光合作用能力高于乙种植物，但乙种植物很适宜在盐碱地种植。且相关性状均为核基因控制。要利用甲、乙两种植物的优势，培育出高产、耐盐的植株，有多种生物技术手段可以利用。下列所采用的技术手段中，不可行的是( )
A.利用植物体细胞杂交技术，可获得满足要求的四倍体杂种目的植株
B.将乙种植物耐盐基因导入到甲种植物的受精卵中，可培育出目的植株
C.两种植物杂交后，得到的F1再利用单倍体育种技术，可较快获得纯种的目的植株
D.诱导两种植物的花粉融合，并培育成幼苗，幼苗用秋水仙素处理，可培育出目的植株
[答案] C
[解析] 两种植物存在着生殖隔离，无法杂交，即使能够杂交，所得F1也不能产生正常可育的配子，因而不能用于单倍体育种。
2.下列是应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤，其中对单克隆抗体制备的相关叙述中不正确的是( )
①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞
②将X抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞
③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养
④筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞
⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞
⑥从腹水中提取抗体
⑦利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合
A.实验顺序应当是①②⑦⑤④③⑥
B.③过程中产生的多个杂交瘤细胞称为克隆
C.⑦过程获得的细胞均可无限增殖
D.利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选
[答案] C
[解析] 骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合时能出现三种融合的细胞，分别是两个B淋巴细胞的融合细胞、两个骨髓瘤细胞的融合细胞、淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞。其中，两个淋巴细胞融合产生的杂交细胞不能无限增殖。克隆分为分子水平、细胞水平和个体水平三个层次，杂交瘤细胞的无限增殖属于细胞水平的克隆。
3.随着生物技术的迅速发展，已灭绝生物的“复活”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚刚死亡，下列“复活”野驴的方法中，最可行的是( )
A.将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体
B.取出野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体
C.取出野驴的体细胞核移植到家驴的去核卵母细胞中，经孕育培养成新个体
D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体
[答案] C
[解析] 选项C为用克隆的方法“复制”刚刚死亡的野驴。
二、非选择题
4.科学家用植物体细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“番茄-马铃薯”杂种植株(如图所示)，其中①～⑤表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。据图回答下列问题：
(1)在实现过程②的技术之前使用________酶处理细胞以去除细胞壁。
(2)在将杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是________，其中过程④相当于________过程，过程⑤涉及的分裂方式为________。
(3)若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞内有n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞内含________条染色体;若杂种细胞培育成的“番茄—马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于________倍体植株。
(4)若将该方案用在单克隆抗体制备过程中，请用箭头把下列各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来：
[答案] (1)纤维素酶和果胶 (2)细胞的全能性 脱分化 有丝分裂 (3)m+n 单
(4)
[解析] (1)植物体细胞杂交过程中应该用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。(2)杂种细胞培育成为杂种植株依据的原理是细胞的全能性，杂种细胞的组织培养过程要经过脱分化和再分化过程，在植物组织培养过程中只涉及有丝分裂。(3)若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞内有n条染色体，则产生的“番茄—马铃薯”细胞所含的染色体为m+n条，属于异源四倍体。该杂种植株的花粉经离体培养得到的植株无论含几个染色体组，均为单倍体。(4)制备单克隆抗体的过程包括“正常小鼠免疫处理→融合→筛选→提纯”四步。
5.如图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病(基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素)的过程图解，请据图回答：
(1)图中所涉及的现代生物技术有________________等。(写3个)
(2)图中①结构表示______________;选择____________(时期)的卵母细胞去核后作为受体细胞构建重组细胞A。②所示的细胞是__________________。
(3)将健康胰岛B细胞基因导入②之前要构建______________，这是基因工程的核心，除含目的基因外，还必须含有______________等。
(4)重组细胞B在一定的细胞分化诱导剂作用下，可以定向分化形成具有正常胰岛B细胞功能的胰岛样细胞，其根本原因是________________________________________。培养重组细胞B的培养液中营养成分包括__________________(至少写两种)。
(5)图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是______________________。
[答案] (1)细胞核移植、转基因技术、动物细胞培养、早期胚胎培养
(2)细胞核 MⅡ中期(或减数第二次分裂中期) 内细胞团细胞(或胚胎干细胞)
(3)基因表达载体 启动子、终止子、标记基因
(4)基因的选择性表达 糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清或血浆
(5)没有免疫排斥反应
6.逆转录病毒载体是一种表达型质粒，结构如图所示。图上的“逆转录病毒序列”可以整合到动物细胞的染色体上，不断地表达其携带的目的基因，获得大量重组逆转录病毒。(E、F、H分别为限制酶E、F、H的酶切位点)。
(1)逆转录的模板是________，原料是________________。
(2)在构建重组质粒时，目的基因插入该质粒，此过程需要的酶是限制酶________和________。
(3)将重组质粒转入大肠杆菌前用某种离子处理大肠杆菌使之成为________，才能完成转化过程。为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加________的培养基进行培养。
(4)获取大量重组质粒后，可培育转基因小鼠，将重组质粒导入小鼠受精卵的方法是______________。若目的基因进入细胞后插入到一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子小鼠的方法是________________。
[答案] (1)RNA (四种)脱氧核苷酸 (2)F DNA连接酶 (3)感受态细胞 抗生素A (4)显微注射(法) 转基因小鼠间相互交配(或杂交)
[解析] (1)逆转录是以RNA为模板，合成DNA的过程，原料是4种脱氧核苷酸。(2)构建重组质粒时，需要用同种限制酶切割质粒和目的基因，使之产生相同的黏性末端，因逆转录病毒序列在F处，所以用限制酶F进行切割，再用DNA连接酶连接，形成重组质粒。(3)将重组质粒导入到大肠杆菌，一般用Ca2+处理大肠杆菌使之成为感受态细胞，才能完成转化过程，质粒上含有抗生素A抗性基因，如果重组质粒导入到受体细胞成功，则受体细胞在含抗生素A的培养基上培养能正常生存。所以为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加抗生素A的培养基进行培养。(4)将重组质粒导入到小鼠受精卵中的方法是显微注射法;将目的基因插入到小鼠的一条染色体DNA上，则小鼠为杂合子，要想获得转基因纯合子小鼠可以让杂合子小鼠之间，相互交配(或杂交)。
7.通过细胞工程技术，利用甲、乙两种高等植物的各自优势，培育具有抗病、耐盐优良性状的杂种植株。请回答下列问题：
(1)A处理目前最常用的方法是________;PEG诱导形成B的原理是________;幼苗C都具有________的优良性状。从C得到目的植株的选择，根本上改变了该植物群体的________________。
(2)植物生理学上将植物体的叶绿体光合作用合成的有机物的量称为植物体的总同化量;而植物体的净同化量为总同化量与细胞呼吸消耗的有机物量的差值。将状况相同的目的植株若干均分成6组，在不同温度下分别暗处理1h，再光照1h(除外界温度不同外，光照强度等其他实验条件适宜且相同)，测其重量变化，得到如下的数据(“+”表示增加，“-”表示减少)。实验组别 第1组 第2组 第3组 第4组 第5组 第6组 环境温度(℃) 26 28 30 32 34 36 暗处理后有机物量的变化(mg) -1 -2 -3 -4.2 -5.5 -5 光照后与暗处理后有机物量的变化 (mg) +3 +4.2 +6.1 +5.8 +5 +3.8 ①暗处理后植物有机物量的变化原因是__________________________。光照后，有机物量的增加是由于____________________。
②在本实验所设定的温度中，最适合该目的植株生长的温度是________℃。
③植物体的总同化量与净同化量分别达到最大值时的最适温度不同的原因是：在一定的温度范围内，光合作用酶与呼吸作用酶的________不同。
[答案] (1)酶解法(纤维素酶和果胶酶处理) 细胞膜的流动性 耐盐(抗病不给分) 基因频率
(2)①细胞呼吸将有机物分解为无机物 光合作用速率大于呼吸作用速率
②30 ③催化效率
