二、非选择题(共3小题)
13.据图回答问题:
(1)过程①和②表明,将S型细菌的________和________与R型活细菌混合培养,其后代为________型细菌。
(2)过程③表明,将S型细菌的________与R型活细菌混合培养,________型细菌转化为________型细菌。
(3)过程④表明,转化成的________型细菌的后代也是________性的________型细菌。
(4)实验最关键的设计思想是______________________________。
(5)艾弗里等人发现通过以上的实验步骤并不严密,仍不足以完全说明DNA是转化因子即遗传物质,又做了一组实验,这组实验应如何设计?_____________________________________________。
(6)通过上述实验能证明DNA是主要的遗传物质而蛋白质不是遗传物质吗?____________________________________________。
答案:(1)多糖 蛋白质 R (2)DNA 少数R S (3)S 有毒 S (4)把S型细菌的DNA和蛋白质分开,单独观察它们在细菌转化过程中的作用 (5)S型细菌的DNA+DNA水解酶+R型活菌→在培养基上培养,最后得到R型菌的菌落 (6)通过上述实验证明了DNA在细菌转化中起到了关键作用,DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质;但不能从该实验得出DNA是主要的遗传物质
14.λ噬菌体有极强的侵染能力,能在细菌中快速进行DNA复制,产生子代噬菌体,最终导致细菌破裂(称为溶菌状态);或者整合到细菌基因组中潜伏起来,不产生子代噬菌体(称为溶原状态)。在转基因技术中常用λ噬菌体构建基因克隆载体,使其在受体细菌中大量扩增外源DNA,以备研究使用。相关操作如下图所示,请回答:
(1)组装噬菌体时,可被噬菌体蛋白质包装的DNA长度约为36~51 kb,则λgt10载体可插入的外源DNA的最大长度为________kb,为获得较大的插入能力,在改造载体时可删除λ噬菌体DNA组成中的________序列以缩短其长度。
(2)λ噬菌体DNA上通常没有适合的标记基因,因此人工改造时需加装适合的标记基因,如上图λgt10载体中的imm434基因,该基因编码一种阻止λ噬菌体进入溶菌状态的阻遏物。在构建基因克隆载体时,需用到的酶是______________,外源DNA的插入位置应位于imm434基因________(填“之中”或“之外”),使经侵染培养后的受体菌处于________状态,表明已成功导入目的基因。
(3)包装用的蛋白质与DNA相比,特有的化学元素是________,若对其进行标记并做侵染实验,则实验结论是____________。
(4)合成噬菌体所需的小分子原料主要是________。分离纯化噬菌体重组DNA时,将经培养10小时左右的大肠杆菌—噬菌体的培养液超速离心,从________(填“上清液”或“沉淀物”)获得噬菌体。
解析:(1)据题意分析可知,λgt10载体的长度为43.4 kb,能被噬菌体蛋白质外壳包装的DNA的最大长度为51 kb,故载体可插入的外源DNA的最大长度为51-42.4=7.6 kb。如欲获得较大的DNA插入能力,可将载体中部的控制溶原生长的序列删除,以缩短载体的原有序列。(2)一般被用作载体的DNA均经过人工改造,构建基因表达载体需要用到的酶包含限制酶和DNA连接酶,应将外源DNA插入imm434基因(控制合成阻止λ噬菌体进入溶菌状态的阻遏物)之中,经侵染培养后受体菌处于溶菌状态,表明已经成功导入目的基因。(3)包装用的蛋白质与DNA相比,特有的元素是S,若对蛋白质进行标记并进行侵染实验,则可以发现蛋白质外壳不进入细菌中。(4)合成噬菌体所需要的小分子原料主要是氨基酸和脱氧核糖核苷酸。噬菌体合成后经长时间培养会裂解大肠杆菌,经离心由于其个体较轻,会处于上清液中。
答案:(1)7.6 kb 中部(含控制溶原生长)
(2)限制酶和DNA连接酶 之中 溶菌
(3)S 蛋白质外壳不进入细菌中
(4)氨基酸和脱氧核苷酸 上清液
15.“噬菌体小组”的赫尔希和蔡斯研究了噬菌体的蛋白质和DNA在侵染过程中的功能,请回答下列有关问题:
(1)他们指出“噬菌体在分子生物学的地位就相当于氢原子在玻尔量子力学模型中的地位一样”。这句话指出了噬菌体作实验材料具有________________的特点。
(2)通过________________的方法分别获得被32P和35S标记的噬菌体,用标记的噬菌体侵染细菌,从而追踪在侵染过程中________变化。
(3)侵染一段时间后,用搅拌机搅拌,然后离心得到上清液和沉淀物,检测上清液中的放射性,得到如图所示的实验结果。搅拌的目的是________,所以搅拌时间少于1 min时,上清液中的放射性________。实验结果表明当搅拌时间足够长以后,上清液中的35S和32P分别占初始标记噬菌体放射性的80%和30%,证明________。图中“被侵染细菌”的存活率曲线基本保持在100%,本组数据的意义是作为对照组,以证明________________,否则细胞外____________放射性会增高。
(4)本实验证明病毒传递和复制遗传特性中________________起着作用。
答案:(1)结构简单,只含有蛋白质和DNA(核酸)
(2)用含32P和35S的培养基分别培养大肠杆菌,再用噬菌体分别侵染被32P和35S标记的大肠杆菌 DNA和蛋白质的位置
(3)将噬菌体和细菌振脱 较低 DNA进入细菌,蛋白质没有进入细菌 细菌没有裂解,没有子代噬菌体释放出来 32P
(4)DNA