6.PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题,而被广泛应用,此过程需要一种Taq DNA聚合酶。
请回答有关问题:
(1)体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA,而PCR技术中应用_____________________________________________________________。
(2)Taq DNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的。
①为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来呢?_____________________
_________________________________________________________________。
②Taq DNA聚合酶的功能是_______________________________________。
③Taq DNA聚合酶的化学本质为蛋白质,可用__________法和__________法进行分离。
④为了使Taq DNA聚合酶能够多次反复利用,可采用__________技术,常用的方法为________________________________________________________。
(3)从土壤中分离分解尿素的细菌时,应采取的措施是__________,原因是____________________________________________________。
(4)相对于细菌分离,DNA分子的分离和提取操作要复杂的多。
在DNA提取中两次用到蒸馏水,其目的分别是:________、__________。
实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料?为什么?______________________________________________________________。
(5)与体内DNA复制相比较,PCR反应要在__________中才能进行,并且要严格控制__________条件。
(6)PCR中加入的引物有__________种,加入引物的作用是
______________________________________________________________。
答案 (1)高温使DNA分子热变性
(2)热泉70~80的高温条件淘汰了绝大多数微生物
催化脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键
凝胶色谱 电泳
固定化酶 化学结合法、物理吸附法
(3)将细菌在培养基中培养,其中唯一的氮源是尿素
只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长和繁殖
(4)使血细胞破裂,释放出DNA分子
稀释 NaCl溶液,使DNA分子析出
不能,哺乳动物成熟的红细胞中无DNA分子
(5)一定的缓冲溶液 温度
(6)2 作为DNA复制的起点